Perfil proteico da hemolinfa de Biomphalaria glabrata e linhagens de B. straminea, frente à exposição ao Schistosoma mansoni / Protein profile of hemolymph of Biomphalaria glabrata and strains of B. straminea, against the exposure to the Schistosoma mansoni

O gênero Biomphalaria possui espécies de grande relevância médica uma vez que atuam como hospedeiros intermediários naturais do parasita Schistosoma mansoni, causador da esquistossomose. Dentro desse gênero de moluscos, três espécies são tidas como hospedeiros naturais do parasita, Biomphalaria glabrata, B. straminea e B. tenagophila. O perfil de suscetibilidade à infecção por S. mansoni dentro do gênero é muito variado e muitas pesquisas buscam elucidar a dinâmica da relação parasita-hospedeiro intermediário na finalidade de criar novas medidas de controle da doença. Por isso, esse estudo tem como objetivo determinar o perfil bidimensional de proteínas que podem estar envolvidas na resposta imune contra o S. mansoni comparando duas espécies com diferentes perfis de susceptibilidade B. glabrata, B. straminea além de uma refratária ao S. mansoni, a B. straminea R3. Para isso, os caramujos de cada espécie foram divididos em dois grupos: Infectado, expostos aos miracídios do S. mansoni; e Controle, submetidos ao estresse do processo de infecção livre de miracídios. A hemolinfa foi retirada 24 horas após a exposição. Foi feito o extrato proteico total e determinada a concentração das proteínas totais para cada grupo investigado. As proteínas foram separadas por eletroforese bidimensional onde foi obtido o ponto isoelétrico e peso molecular de todos os spots nos géis...

The Biomphalaria has species of great medical relevance since that act as natural intermediate hosts of the parasite Schistosoma mansoni, which causes schistosomiasis. Within this kind of mollusks, three species are considered natural hosts of the parasite, Biomphalaria glabrata, B. stramineaand B. tenagophila. The profile of usceptibility to S. mansoni infection within the genre is very varied and many studies seek to elucidate the dynamics of host-parasite relationship intermediary in order to create new disease control easures. Therefore, this study aims to determine the two-dimensional profile of proteins that may be involved in the immune response against S. mansonicomparing two species with different susceptibility profiles B. glabrata, B. straminea and a refractory to S. mansoni, B. straminea R3. For that, the snails of each species were divided into two groups: Infected exposed to iracidia of S. mansoni; and control, subjected to stress the miracidia free infection process. The hemolymph was removed 24 hours after exposure. It was made the total protein extract and determined the concentration of total protein for each group investigated. Proteins were separated by two-dimensional electrophoresis was obtained where the isoelectric point and molecular weight of all the spots in the gels...

Análise da variabilidade imunológica e da expressão dos genes FREPs entre as espécies Biomphalaria glabrata e B. straminea com diferentes perfis de suscetibilidade ao parasito Schistosoma mansoni / Analysis of immune variability and expression of FREPS genes between the species Biomphalaria glabrata and B. straminea with different susceptibility profiles to infection to by Schistosoma mansoni

Algumas espécies do gênero Biomphalaria se apresentam como potenciais hospedeiras ao parasito Schistosoma mansoni, estando a suscetibilidade a este parasito, neste gênero, ligada ao sistema interno de defesa de cada espécie de Biomphalaria. Um dos componentes importantes no sistema imune de invertebrados é a enzima fenoloxidase, que ainda apresenta muitos aspectos desconhecidos no sistema de defesa do gênero Biomphalaria. Foi relatado também que os genes de proteínas relacionadas ao fibrinogênio (FREPs) possuem importância na resposta imune de Biomphalaria glabrata, entre esses, as subfamílias dos FREPs 3 e 4 são diferencialmente expressas em linhagens susceptíveis e resistentes frente a infecção com trematódeos. No entanto os trabalhos existentes em sua maioria estudam a espécie Biomphalaria glabrata, excluindo a espécie Biomphalaria straminea, amplamente distribuída no Brasil e principal responsável pela disseminação da esquistossomose. Tendo em vista a falta de conhecimento sobre a resposta imune destes moluscos hospedeiros, principalmente em relação à expressão de genes imune relevantes e ao tipo de resposta, o presente trabalho se propôs a estudar a variação do número de hemócitos, da produção de fenoloxidase e da expressão dos genes dos FREP 3 e FREP 4 envolvidos com a ligação a antígenos de trematódeos, nas espécies Biomphalaria glabrata, Biomphalaria straminea pós-infecção com S. mansoni, bem como em caramujos pré-expostos a antígenos de S. mansoni...

Interaction between primary and secondary sporocysts of Schistosoma mansoni and the internal defence system of Biomphalaria resistant and susceptible to the parasite

The outcome of the interaction between Biomphalaria and Schistosoma mansoni depends on the response of the host internal defence system (IDS) and the escape mechanisms of the parasite. The aim of this study was to evaluate the responsiveness of the IDS (haemocytes and soluble haemolymph factors) of resistant and susceptible Biomphalaria tenagophila lineages and Biomphalaria glabrata lineages in the presence of in vitro-transformed primary sporocysts and secondary sporocysts obtained from infected B. glabrata. To do this, we assayed the cellular adhesion index (CAI), analysed viability/mortality, used fluorescent markers to evaluate the tegumental damage and transplanted secondary sporocysts. B. tenagophila Taim was more effective against primary and secondary sporocystes than the susceptible lineage and B. glabrata. Compared with secondary sporocysts exposed to B. tenagophila, primary sporocysts showed a higher CAI, a greater percentage of dead sporocysts and were labelled by lectin from Glycine max and Alexa-Fluor 488 fluorescent probes at a higher rate than the secondary sporocysts. However, the two B. tenagophila lineages showed no cercarial shedding after inoculation with secondary sporocysts. Our hypothesis that secondary sporocysts can escape the B. tenagophila IDS cannot be confirmed by the transplantation experiments. These data suggest that there are additional mechanisms involved in the lower susceptibilty of B. tenagophila to S. mansoni infection.

Estudo do sistema inato de defesa de Biomphalaria tenagophila (d’ Orbigny, 1835) frente ao Schistosoma mansoni Sambon, 1907

A fenoloxidase (PO) é uma enzima envolvida no processo de melanização. A melanização é um mecanismo de defesa contra patógenos, muito importante para diversos invertebrados, inclusive, alguns artigos já descreveram a existência dessa enzima em Biomphalaria glabrata. Utilizando B. tenagophila (linhagem resistente Taim e linhagem susceptível Cabo Frio), tentou-se esclarecer, por meio de experimentos “in vivo” e “in vitro”, a real importância desse sistema enzimático no processo de resistência da Biomphalaria ao S. mansoni. Verificou-se que, apesar do sistema fenoloxidase apresentar, em alguns experimentos, uma atividade significativamente maior, principalmente na linhagem Taim, na presença do S. mansoni, não foi possível afirmar que esse sistema tem importância no mecanismo de resistência da B. tenagophila Taim contra S. mansoni, pois a ativação enzimática ocorreu em todas as linhagens testadas. Quando os testes da atividade enzimática foram realizados, utilizando Echistosoma paraensei (trematódeo, digenea), que infecta a linhagem Taim, os resultados foram semelhantes. Outro aspecto estudado neste trabalho foi a resposta do sistema interno de defesa (SID - hemócitos, fração solúvel e hemolinfa total) da B. glabrata e B. tenagophila (Taim e Cabo Frio), frente aos esporocistos secundários, obtidos de caramujos B. glabrata infectadas. Já foi descrito na literatura o processo de mascaramento/mimetismo molecular como mecanismo de evasão do parasito.

Assim, utilizando os esporocistos secundários, foi possível demonstrar que os esporocistos primários são mais afetados pelo SID da Biomphalaria (principalmente Taim) do que os esporocistos secundários. Os esporocistos primários apresentaram maior mortalidade e danos no tegumento do que os esporocistos secundários. No entanto, a inoculação dos esporocistos secundários, provenientes de B. glabrata, obteve sucesso apenas na espécie análoga, resultando na eliminação de cercárias, trinta dias após a inoculação. O mesmo não ocorreu nas linhagen de B. tenagophila Taim e Cabo Frio. Dessa forma, o mimetismo/mascaramento molecular é um mecanismo possível, porém experimentos utilizando esporocistos secundários provenientes da B. tenagophila são necessários para verificar a real importância desse processo como mecanismo de escape do parasito em relação a B. tenagophila Taim

Estudo do sistema inato de defesa de Biomphalaria tenagophila (d’ Orbigny, 1835) frente ao Schistosoma mansoni Sambon, 1907 / Study of the innate defense system of Biomphalaria tenagophila (d'Orbigny, 1835) against the Schistosoma mansoni Sambon, 1907

A fenoloxidase (PO) é uma enzima envolvida no processo de melanização. A melanização é um mecanismo de defesa contra patógenos, muito importante para diversos invertebrados, inclusive, alguns artigos já descreveram a existência dessa enzima em Biomphalaria glabrata. Utilizando B. tenagophila (linhagem resistente Taim e linhagem susceptível Cabo Frio), tentou-se esclarecer, por meio de experimentos “in vivo” e “in vitro”, a real importância desse sistema enzimático no processo de resistência da Biomphalaria ao S. mansoni. Verificou-se que, apesar do sistema fenoloxidase apresentar, em alguns experimentos, uma atividade significativamente maior, principalmente na linhagem Taim, na presença do S. mansoni, não foi possível afirmar que esse sistema tem importância no mecanismo de resistência da B. tenagophila Taim contra S. mansoni, pois a ativação enzimática ocorreu em todas as linhagens testadas. Quando os testes da atividade enzimática foram realizados, utilizando Echistosoma paraensei (trematódeo, digenea), que infecta a linhagem Taim, os resultados foram semelhantes. Outro aspecto estudado neste trabalho foi a resposta do sistema interno de defesa (SID - hemócitos, fração solúvel e hemolinfa total) da B. glabrata e B. tenagophila (Taim e Cabo Frio), frente aos esporocistos secundários, obtidos de caramujos B. glabrata infectadas. Já foi descrito na literatura o processo de mascaramento/mimetismo molecular como mecanismo de evasão do parasito.

Assim, utilizando os esporocistos secundários, foi possível demonstrar que os esporocistos primários são mais afetados pelo SID da Biomphalaria (principalmente Taim) do que os esporocistos secundários. Os esporocistos primários apresentaram maior mortalidade e danos no tegumento do que os esporocistos secundários. No entanto, a inoculação dos esporocistos secundários, provenientes de B. glabrata, obteve sucesso apenas na espécie análoga, resultando na eliminação de cercárias, trinta dias após a inoculação. O mesmo não ocorreu nas linhagen de B. tenagophila Taim e Cabo Frio. Dessa forma, o mimetismo/mascaramento molecular é um mecanismo possível, porém experimentos utilizando esporocistos secundários provenientes da B. tenagophila são necessários para verificar a real importância desse processo como mecanismo de escape do parasito em relação a B. tenagophila Taim

Biomphalaria alexandrina snails as immunogens against Schistosoma mansoni infection in mice

Despite effective chemotherapy, schistosomiasis remains the second largest public health problem in the developing world. Currently, vaccination is the new strategy for schistosomiasis control. The presence of common antigenic fractions between Schistosoma mansoni and its intermediate host provides a source for the preparation of a proper vaccine. The objective of this paper is to evaluate the nucleoprotein extracted from either susceptible or resistant snails to protect against schistosomiasis. The vaccination schedule consisted of a subcutaneous injection of 50 µg protein of each antigen followed by another inoculation 15 days later. Analyses of marker enzymes for different cell organelles [succinate dehydrogenase, lactate dehydrogenase (LDH), glucose-6-phosphatase, acid phosphatase and 5'-nucleotidase] were carried out. Energetic parameters (ATP, ADP, AMP, phosphate potentials, inorganic phosphate, amino acids and LDH isoenzymes) were also investigated. The work was extended to record worm and ova counts, oogram determination in the liver and intestine and the histopathological pattern of the liver. The nucleoprotein of susceptible snails showed reduction in worm and ova counts by 70.96 percent and 51.31 percent, respectively, whereas the nucleoprotein of resistant snails showed reductions of 9.67 percent and 16.77 percent, respectively. In conclusion, we found that the nucleoprotein of susceptible snails was more effective in protecting against schistosomiasis.

The effect of early infection with Echinostoma paraensei on the interaction of Schistosoma mansoni with Biomphalaria glabrata and Biomphalaria tenagophila

Infection caused by the trematode Echinostoma paraensei has been shown to interfere in the natural resistance to infection by Schistosoma mansoni. Biomphalaria glabrata is susceptible to infection, while Taim isolate Biomphalaria tenagophila is resistant to infection by S. mansoni. These two snail species were assessed for infection with E. paraensei two days after exposure to S. mansoni miracidia. The number of B. tenagophila and B. glabrata infected with E. paraensei was lower in co-infected group, suggesting an antagonistic relationship. B. glabrata showed an increase in its susceptibility to S. mansoni, whereas B. tenagophila maintained its refractoriness to S. mansoni infection. Weekly comparisons made between the E. paraensei cercariae released from B. tenagophila and B. glabrata mono-infected snails revealed no quantitative differences. In contrast, S. mansoni cercariae released were higher in the B. glabrata co-infected group. Mortality rates were significantly greater in both species pertaining to co-infected group and unexpected mortalities were also observed in B. tenagophila exposed only to S. mansoni miracidia. Our study revealed that the B. tenagophila Taim isolate is susceptible to E. paraensei infection, although infection did not alter its resistance to S. mansoni infection.

Behaviour of albino and melanic variants of Biomphalaria glabrata Say, 1818 (Mollusca: Planorbidae) following infection by Schistosoma mansoni Sambon, 1907 / Comportamento de Biomphalaria glabrata variantes albina e melânica frente à infecção pelo Schistosoma mansoni

The behaviour of the albino and melanic variants of Biomphalaria glabrata of Belo Horizonte (MG. Brazil) was studied comparatively, in terms of their respective susceptibilities to infection by Schistosoma mansoni of the same origin, through observation of the elimination of cercariae for a three-month period and the calculation of mortality and infection rates, in control and in infected snails. The number of amoebocytes, granulocytes and hyalinocytes in the circulating hemolymph during different periods of infection was analyzed. The evolution of the infection in the tissues was observed by means of histological cross-sections. The melanic variant showed greater susceptibility to infection and a higher mortality rate. The albino variant showed a higher number of circulating amoebocytes, both granulocytes and hyalinocytes. A higher number of degenerated sporocysts were seen in the histological cross-sections of the albino variant. The results suggest that the melanic variant of B. glabrata was more susceptible to infection by S. mansoni than was the albino variant.

Foi estudado comparativamente o comportamento das variantes albina e melânica de Biomphalaria glabrata de Belo Horizonte (MG. Brasil), em relação à susceptibilidade à infecção pelo Schistosoma mansoni de mesma origem, através da observação da eliminação de cercárias por um período de três meses e a verificação das taxas de mortalidade e infecção nos moluscos controles e infectados. Analisou-se também, o número de amebócitos granulócitos e hialinócitos na hemolinfa circulante em diferentes períodos de infecção. A evolução da infecção nos tecidos foi observada através de cortes histológicos. A variante melânica apresentou maior susceptibilidade à infecção e maior taxa de mortalidade. A variante albina apresentou maior número de amebócitos circulantes, tanto granulócitos quanto hialinócitos. Nos cortes histológicos foi verificado maior número de esporocistos degenerados na variedade albina. Por estes resultados sugere-se que nas populações estudadas a variante melânica de B. glabrata, foi mais susceptível à infecção pelo S. mansoni.

Changes induced in Biomphalaria glabrata (Say, 1818) following trials for artificial stimulation of its internal defense system

Biomphalaria glabrata can react through different pathways to Schistosoma mansoni miracidium penetration, according to the degree of resistance/susceptibility presented by different snail strains, which is a genetically determined character, resistance being the dominant feature. However, it has been observed that previous susceptible snail strain may change its reactive behavior along the course of infection, exhibiting later a pattern of cercarial shedding and histopatopathological picture compatible with high resistance. Such observation suggests the possibility of B. glabrata to develop a sort of adaptative immunity face a schistosome infection. To explore on this aspect, the present investigation looked for the behavior of S. mansoni infection in B. glabrata previously subjected to different means of artificial stimulation of its internal defense system. Snails previously inoculated with irradiated miracídia (Group I); treated with S. mansoni antigens (Group II) or with a non-related parasite antigen (Group III) were challenged with 20 viable S. mansoni miracidia, and later looked for cercarial shedding and histopathologic changes at different times from exposition. Nodules of hemocyte accumulations were found at the site of antigen injection. These nodules resembled solid granulomas, and were larger and more frequent in snails injected with S. mansoni products as compared to those injected with Capillaria hepatica. However, the presence of such granulomas did not avoid the S. mansoni challenge infection from developing in a similar way as that seen in controls. The data are indicative that hemocytes are able to proliferate locally when stimulated, such capacity also remaining localized, not being shared by the population of hemocytes located elsewhere within the snail body.

Compatibility of Biomphalaria tenagophila with Schistosoma mansoni: a study of homologous plasma transference

This study aims to investigate the importance of the serum factors present in the plasma of resistant Biomphalaria tenagophila snails, when transferred to susceptible conspecific. Susceptible B. tenagophila (CF) received plasma from resistant B. tenagophila (Taim), and both were later infected with Schistosoma mansoni. We noticed that the plasma transfer showed an increase on the resistance of susceptible snails of about 86 percent when compared to the non-immunized group (p < 0.001).

Reinfecçöes e desenvolvimento da fibrose periportal esquisomótica no modelo murino / Reinfections and the development of schistosomal periportal fibrosis in the murine model

A fibrose periportal esquistossomótica observada no modelo murino apareceu muito mais freqüentemente (69,2 por cento) em camundongos submetidos a múltiplas infecçöes pelo Schistosoma mansoni do que naqueles animais com infecçäo única (11,1 por cento). A contagem dos ovos depositados no fígado näo diferiu significativamente nos dois grupos ao término dos experimentos. Embora näo tenha ficado esclarecido o motivo pelo qual as infecçöes repetidas favorecem o desenvolvimento da fibrose periportal esquistossomótica, os dados observados fornecem apoio experimental às observaçöes clínico-epidemiológicas que sugerem ter as reinfecçöes um papel na patogenia da forma hepato-esplênica da esquistossomose

Changes in the behavioral and immunological parameters of the mollusk Biomphalaria tenagophila induced by disruption of the circadian cycle as a consequence of continuous illumination

In the present investigation we studied some behavioral and immunological parameters of adult gastropod mollusk, Biomphalaria tenagophila, which have been reproducing for several generations under laboratory conditions. One group of gastropods was kept on a 14-h light/10-h dark cycle, corresponding to a regular circadian cycle, and another group was exposed to continuous light for 48 h. Animals were studied along (behavioral groups) or immediately after (immunological groups) 48 h of regular circadian cycle or continuous light conditions. Stopping/floating, dragging and sliding were the behavioral aspects considered (N = 20 for regular cycle; N = 20 for continuous illumination) and number of hemocytes/µl hemolymph was the immunological parameter studied (N = 15 for regular cycle, N = 14 for continuous illumination). Animals under continuous illumination were more active (sliding = 33 episodes, dragging = 48 episodes) and displayed a lower number of hemocytes (78.0 + or - 24.27/µl) when compared with mollusks kept on a regular circadian cycle (sliding = 18 episodes, dragging = 27 episodes; hemocytes = 157.6 + or - 53.27/µl). The data are discussed in terms of neural circuits and neuroimmunological relations with the possible stressful effect of continuous illumination.

Comportamento dos amebócitos circulantes de moluscos planorbídeos frente ao parasitismo por larvas de Schistosoma mansoni, inoculaçäo de tinta nanquim e fratura da concha / Behavior of hemolymph amebocytes from planorbidae in the presence of Schistosoma mansoni larvae parasitism, by inoculation of Indian ink or fracture of the shell

Foi estudado o comportamento dos amebócitos circulantes de Biomphalaria glabrata e Biomphalaria tenagophila mediante à infecçäo pelo Schistosoma mansoni, à inoculaçäo de tinta Nanquim e à fratura da concha. Foi realizada contagem diferencial de amebócitos na hemolinfa, dando-se ênfase aos tipos de células encontradas em cada amostra; avaliaçäo histopatológica dos moluscos submetidos à exposiçäo aos miracídios de S. mansoni; e análise da morfologia dos amebócitos através de microscopia de fase. Foi verificada correlaçäo entre a variaçäo do número de amebócitos circulantes e a reaçäo tecidual. Em Biomphalaria tenagophila somente houve aumento do número de amebócitos estrelados quando os moluscos eram infectados por S. mansoni, o que sugere a especificidade da reaçäo ao parasitismo. Comparando os resultados obtidos em B. glabrata e B. teganophila, conclui que esses moluscos apresentam comportamentos amebocitários diferentes frente aos diversos estímulos utilizados

Estudo de variáveis que podem influenciar na evoluçäo da esquistossomose mansônica: efeito da terapêutica específica e da interrupçäo da transmissäo / Study of variables that may influence in the evolution of the hepatosplenic form of Schistosomiasis mansoni: effect of specific therapy and interruption of the transmission

O desenvolvimento da forma hepatatoesplênica da esquistossomose mansônica, ainda näo foi completamente esclarecido. Geralmente säo invocadas a intensidade da carga parasitária, as reinfecçöes sucessivas ou periódicas, a resposta imunológica do hospedeiro, a raça e a terapêutica específica, como fatores marcantes para explicar a razäo pela qual, somente pequeno percentual dos parasitados desenvolve essa forma de doença. O presente trabalho faz parte do "Projeto sobre Esquistossomose na Chapada Diamantina - Bahia - Brasil", tendo como objetivo contribuir para o conhecimento do papel das variáveis intensidade de carga parasitária, reinfecçöes sucessivas, terapêutica específica e raça, no desenvolvimento da forma hepatoesplênica, por ser esta, a mais frequênte das formas graves da doença. Um programa de controle da esquistossomose foi desenvolvido em uma área hiperendêmica de esquistossomose, através do uso de moluscicida durante dez anos, com a ajuda da comunidade local. Exames clínicos e parasitológicos de fezes foram realizados antes, durante o período de interrupçäo da transmissäo e após o retorno da transmissäo da parasitose. Ao longo dos quinze anos de seguimento dessa populaçäo, algumas pessoas fizeram uso de medicaçäo anti-esquissomótica, por demanda espontânea e outras näo. A avaliaçäo parasitológica foi feita através os exames de fezes qualitativo e quantitativo, determinando a prevalência e a intensidade da carga parasitária, pelo número de ovos eliminados nas fezes e sua média geométrica. A avaliaçäo da evoluçäo clínica foi feita pela análise do tamanho do fígado e do baço, e pela classificaçäo das formas clínicas, comparando-se o exame inicial com os exames subsequentes. Os principais parâmetros clínicos de evoluçäo - hepatomegalia, esplenomegalia e forma hepatoesplênica - foram analisados em relaçäo à populaçäo geral e ao tratamento específico. Em cada uma dessas situaçöes, os dados foram analisados de acordo com a idade e a raça. O processamento e a análise dos dados foram feitos de acordo com o modelo estatístico mais apropriado para determinado caso, utilizando-se pacotes estatísticos adequados e considerando-se como significante o encontro de p menor que 0,05. Os resultados obtidos permitem confirmar que a intensidade da carga parasitária está diretamente relacionada com o desenvolvimento da forma hepatoesplênica e que o grupo racial negro apresenta maior resistência a desenvolver esta forma clínica da doença...

Studies on host-parasite relationship between the Puerto Rican strain of Schistosoma mansoni and Biomphalaria snails.

Immunoelectrophoretic studies on common antigenicities were carried out by using rabbits sera immunized with the Puerto Rican strain of Schistosoma mansoni adult worms or eggs and antigens of several adult Biomphalaria snails and vice versa. As the result, S. mansoni adult worm extracts produced 8 bands both with extracts of Biomphalaria glabrata pigmentation and B. glabrata pigmentado, 3 to 4 bands with those of B. glabrata albino and 1 to 2 bands with those of B. straminea. On the other hand, S. mansoni egg extracts produced 5 bands with extracts of B. glabrata pigmentation, 4 bands with those of B. glabrata pigmentado, 2 bands with those of B. glabrata albino and 1 band with those of B. straminea. In the experimental infection of adult Biomphalaria snails with five S. mansoni miracidia, the infection rate in B. glabrata pigmentation was 78.8%, and 71.2% in B. glabrata pigmentado, whereas the infection rate in B. glabrata albino was 10.3%, and B. straminea was not susceptible to S. mansoni. The infectivity of each snail corresponded with the number of bands representing common antigenicities between host and parasite. Crude antigens of Biomphalaria snails were fractionated by Sephadex G-100 column, and each antigen fraction was tested with anti-S. mansoni adult worm and egg sera by immunoelectrophoresis. The common antigenicities between fractionated antigens of Biomphalaria snails and of ani-S. mansoni adult worm or egg sera mostly existed in the first fraction 1 with Mr > 45 kDa.

Aspectos imunológicos e parasitológicos em Biomphalaria tenagophila infectadas por Schistosoma mansoni e outros Digenea / Immunological and parasitological aspects of Biomphalaria tenagophila infected by Schistosoma mansoni and other Digenea

Estuda o comportamento de amebócitos de Biomphalaria tenagophila infectadas por Schistosoma mansoni, por outros Digenea e a resistência à superinfecçäo, presente em infecçöes mistas. Foi verificada a atividade fagocitária dos amebócitos, o número destas células circulantes, a reaçäo amebocitária nos tecidos, o perfil eletroforético da hemolinfa, além da reaçäo de imunodifusäo. Conclui que moluscos infectados por outros Digenea apresentam resistência à superinfecçäo por S. mansoni, sendo que os amebócitos parecem näo ter participaçäo direta na destruiçäo dos esporocistos de S. mansoni nesta eventualidade. Nos moluscos infectados, observa maior número de amebócitos circulantes e aumento de capacidade fagocitária destas células

Caracterizaçäo do gene da triose fosfato isomerase do schistosoma mansoni / Characterization of the gene ensyme triose phosphate isomerase of schistosoma mansoni

O gene completo codificando a enzima triose fosfato isomerase (TPI) do Schistosoma mansoni foi caracterizado a partir do estudo de dois ciclones exibindo áreas de superposiçäo, isolados, de uma biblioteca genômica em fago de lambda. Estes clones genômicos foram caracterizados através de mapas de restriçäo, sequenciamento do DNA envolvendo a regiäo a montante do gene ("5' flanking region"), exons, limites dos entrons e o sítio de poli-adenilaçäo. O gene da TPI do Schistosoma mansoni é codificado por 6 exons ocupando uma regiäo de aproximadamente 12 Kb. Os cinco introns estäo situados em posiçöes análogas aquelas para os genes da TPI de mamíferos, porém um dos 6 introns da TPI de mamíferos está ausente no S. mansoni. Nós näo encontramos evidências da participaçäo de "spliced leader" na expressäo do gene do TPI. O gene é precedido de pelo menos 4 cópias de sequências repetitivas de 2.5 Kb dispostas de forma linear. Apesar do gene de TPI de S. mansoni com 12 Kb, ser muito maior que um gene típico da TPI de um mamífero, o qual tem em média 3-4 Kb, ele apresenta o primeiro intron com apenas 42 bp. O sítio de iniciaçäo de transiçäo do S. mansoni é heterogêneo. A análise pela técnica de "Southern blot" sugere que o gene da TPI de S. mansoni se expressa a partir de uma única cópia do gene